药用植物通关藤根尖染色体制片技术初探.doc

摘要:通关藤（Marsdenia tenacissima）是萝藦科牛奶菜属植物，其制剂对多种癌症的治疗具有良好的疗效。但野生通关藤资源蕴藏量逐渐减少、种质资源复杂混乱现象严重等问题日益凸显，深入开展人工栽培和种质资源的鉴定工作已是刻不容缓。核型分析对通关藤种质资源的鉴定以及遗传育种工作具有重大的意义，而良好的染色体制片技术是核型分析的必要条件。因此，本研究以通关藤根尖为材料, 对制片技术过程中的材料选择、取材时间、预处理时间、解离时间、染色时间5个方面进行试验探究, 并观察统计通关藤的染色体数目。结果表明：通关藤染色体数目为22条；于上午9:00选取种子萌发根尖，用饱和对二氯苯溶液在20℃避光通氧条件下预处理2h，经卡诺固定液4-5℃下固定2-24h，然后用0.075mol/L KCl溶液在25℃下做前低渗处理（时间15-30min）；再于60℃水浴条件下用1mol/LHCl 解离处理8min，换用新鲜蒸馏水后低渗浸泡20-30min，再用改良的石炭酸品红染液染色15min后进行压片，能获得分散良好、清晰、染色效果良好的染色体中期分裂图象。

关键词：通关藤；染色体；制片技术

目录

摘要

ABSTRACT

1.前言-1

1.1通关藤的研究现状-1

1.2染色体制片技术-1

1.3通关藤种质资源混乱研究现状-2

1.4本研究的目的及意义-2

2.材料与方法-3

2.1试验材料-3

2.2试验试剂及器材-3

2.3试验方法-3

3.结果与分析-5

3.1不同材料对制片效果的影响-5

3.2不同取材时间对制片效果的影响-5

3.3不同预处理时间对制片效果的影响-5

3.4不同解离时间对制片效果的影响-6

3.5不同染色时间对染色效果的影响-7

4.讨论-8

4.1不同材料和取材时间对制片效果的影响评价-8

4.2不同预处理方法对制片效果的影响评价-8

4.3制片中解离方法的筛选-8

4.4不同染色方法对染色效果的影响评价-9

5.结论-10

参考文献-11

致　谢-13