固定化菌株产内切葡聚糖酶活性分析.doc

摘要:本实验测定纤维素酶活时所用的显色剂是3，5-二硝基水杨酸（简称DNS），底物是CMC和滤纸，运用DNS法来测定纤维素酶的滤纸酶活和CMC酶活。以海藻酸钠为固定化载体将本实验所用的重组P. ananatis内切葡聚糖酶菌株固定化并测其固定化前后菌株的酶活再对固定化前后的酶活进行比较，以此来确定将菌株用海藻酸钠固定化后纤维素酶的酶活力是否有所提高。实验结果显示，固定化后纤维素酶的滤纸酶活为1.086U/ml，CMC酶活为0.806U/ml，固定化前的滤纸酶活为0.784U/ml，CMC酶活为0.508U/ml。结论表明重组P. ananatis内切葡聚糖酶菌株固定化后的纤维素酶酶活比固定化前的高，有利于工业化、自动化生产。

关键词 纤维素酶；固定化；滤纸酶活；CMC酶活

目录

摘要

Abstract

1绪论-1

1.1酶与细胞的固定化-1

1.1.1酶的固定化-1

1.1.2细胞的固定化-4

1.2产纤维素酶的研究-6

1.2.1纤维素酶的作用机理-6

1.2.2产纤维素酶菌种的选育-7

1.2.3测定纤维素酶活的方法-8

1.2.4纤维素酶的应用-8

1.3分子酶学-9

1.4研究的内容和意义-10

1.4.1研究内容-10

1.4.2研究意义-10

2 实验材料与方法-11

2.1 材料和试剂-11

2.1.1 实验菌株-11

2.1.2 实验试剂-11

2.1.3 实验设备-12

2.2 实验方法-13

2.2.1 培养基的配制-13

2.2.2 主要试剂和溶液的配制-13

2.2.3 培养基的灭菌-13

2.2.4 葡萄糖标准曲线的绘制-14

2.2.5 工程菌的活化和培养-14

2.2.6 细胞的固定化-14

2.2.7 酶活的测定-15

3 结果与分析-17

3.1 菌株的活化-17

3.2 菌液的摇床培养-18

3.3 菌株的固定化-19

3.4 固定化菌株的摇床培养-20

3.5 葡萄糖标准曲线-21

3.6 固定化前的酶活-21

3.7 固定化后的酶活-22

3.8 固定化方法的讨论-22

结论-23

致谢-24

参考文献-25