醋酸杆菌中乙醛脱氢酶的提取工艺_食品生物工程.doc

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  • 更新时间:2014-09-16
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摘要:本研究以实验室保存的醋酸杆菌为材料,研究醋酸杆菌的破碎方法,得出破碎醋酸杆菌较好的方法有超声波法,曲拉通法以及溶菌酶酶法,可以得到较高的蛋白质含量和较高的乙醛脱氢酶(ALDH)酶活。进行破碎方法联合时发现超声波法容易使ALDH失活,故采用曲拉通与溶菌酶联合破碎方法。优化此方法时得到的最优条件如下:溶菌酶浓度为7mg/mL,溶菌酶作用时间80min,曲拉通浓度是10%,曲拉通作用时间为8min。此条件下得到ALDH的最高酶活为0.502U/mL。

关键词:醋酸杆菌;破碎方法;ALDH;蛋白质含量;酶活

 

   目前认为,大量饮酒导致的毒性反应不是乙醇造成的,而是乙醇在体内代谢产物乙醛造成的。乙醛具有强烈的毒理作用,它能促进人体内儿茶酚胺的释放,既而会导致心率加快、心排血量增加、外周血管扩张等生理反应,更有部分人会表现出面部潮红[3]。

   尽管乙醛在大量组织中很快被代谢,但在乙醇氧化时,乙醛的代谢产物就会大量积聚在肝脏和血液中,而细胞膜在进行脂质过氧化时,血液中的乙醛浓度也会增加。大量的乙醛会与血细胞成分进行可逆性结合,经血液运输并在心脏外组织释放。乙醛与多种蛋白质进行共价结合,从而改变器官的功能与结构。乙醛与蛋白质的加合物的会损害许多酶的催化功能,导致抗乙醛抗原决定簇抗体的产生,结果会加重乙醇对肝损害的诱导[2]。

   ALDH的生理意义主要在于它能够对乙醛的解毒作用。各种各样的酒类都含有酒精,饮酒后可导致心跳速率加快、血压升高、脸红、皮肤变热的急性酒精中毒的症状,而人类因个体和种族的差异对酒精的耐受能力也有所不同,有数据表示,黄种人中对酒精敏感的几率为80%[4]。在饮酒后,大多数黄种人由于缺少乙醛脱氢酶,使得乙醛在体内大量积累,从而导致酒精中毒。解酒关键在于加速分解乙醛,使之生成乙酸,再进一步分解为CO2和H2O,而在这过程中ALDH的作用甚为重要[5]。眼组织可以通过光照射、紫外光吸收和氧的供应合成大量的过氧化醛,而角膜和晶状体ALDHs可迅速降解合成的过氧化醛,而发挥重要的解毒作用[6]。


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