苏丹红Ⅰ抗原的合成和抗体的制备_食品生物工程.doc

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  • 更新时间:2014-09-16
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摘要:苏丹红I号是一种遗传毒性致癌物质,还是一种化学染色剂,全球多数国家在食品生产方面都禁止将其使用。苏丹红I号也一直被我国各地的质检部门检验监管,严防含有苏丹红 I的食品在中国市场流通。本实验用琥珀酸酐法合成带有羟基臂的苏丹红Ⅰ-半琥珀酸酯(苏丹红Ⅰ-HS),进一步采用活性酯法制备了苏丹红Ⅰ-HS与BSA和OVA偶联的人工抗原。通过对人工抗原的测定,发现人工抗原的紫外吸收光谱呈现与载体蛋白的紫外吸收光谱不同的吸收峰,并偶联测得人工抗原中苏丹红Ⅰ与载体蛋白的结合比。实验说明偶联物与其前体物质有不同的紫外吸收特征,苏丹红Ⅰ-HS和BSA可以通过碳二亚胺法进行连接,合成后紫外吸收峰发生蓝移,表明本实验的苏丹红人工抗原的合成是成功的。通过公式计算得到,人工抗原苏丹红I-HS-BSA的结合比为11:1,包被抗原苏丹红I-HS-OVA的结合比为5:1。下一步进行动物免疫试验。用间接ELISA(酶联免疫吸附测定)方法对细胞进行鉴定。从而判断合成的人工抗原是否能用于试验的小鼠,制备单克隆抗体,为以后的免疫分析工作建立良好的基础。

 

关键词苏丹红I号;人工抗原;碳二亚胺法;鉴定;动物免疫


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