三唑磷半抗原、人工抗原的合成与抗体制备.doc

摘要:三唑磷作为一种高效有机磷农药被广泛使用，但目前对其的免疫分析检测方法尚不常见。本文以三唑磷为研究对象，设计并利用三步反应最终生成三唑磷半抗原，然后采用碳二亚胺法，将三唑磷半抗原与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联进而制备免疫抗原，与卵清白蛋白(OVA)进行偶联进而制备包被抗原，并使用紫外分光光度计对半抗原、BSA、OVA、免疫抗原、包被抗原的特征吸收峰进行测定，从而测得三唑磷免疫抗原的吸收峰在272nm处，介于BSA(278nm)与半抗原(235nm)的吸收峰值之间，从而可以判定半抗原与载体蛋白偶联成功。将偶联成功的三唑磷半抗原-BSA作为免疫原对小鼠进行多次免疫注射，进而获得含有三唑磷抗体的多抗血清，为三唑磷的免疫分析检测做出了理论与实际铺垫。

关键词：三唑磷；半抗原；人工抗原；抗体

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 农药概况-1

1.1.1 农药定义及其分类与特点-1

1.1.2 农药的使用现状-1

1.1.3 农药的危害-2

1.1.4 农药的检测方法-2

1.2 三唑磷概况-3

1.2.1 三唑磷简介-3

1.2.2 三唑磷危害-4

1.2.3 三唑磷检测-4

1.3 半抗原与载体偶联技术-5

1.3.1 载体蛋白简介-6

1.3.2 偶联方法简介-6

1.4 本论文研究的目的及意义-6

2 材料与方法-8

2.1 实验试剂与仪器-8

2.1.1 实验试剂-8

2.1.2 实验仪器-8

2.1.3 实验材料-8

2.2 实验方法-8

2.2.1 三唑磷半抗原的合成-8

2.2.2 三唑磷人工抗原的合成-9

2.2.3 紫外分光光度法判定偶联-10

2.2.4 小鼠免疫及抗体制备-11

3 结果与分析-13

3.1 三唑磷半抗原的合成-13

3.2 三唑磷人工抗原的合成-13

3.3 紫外分光光度法判定偶联-14

3.4 小鼠免疫及抗体制备-16

结论-18

致谢-19

参考文献-20