产转谷氨酰胺酶菌株的筛选与发酵条件优化.doc

摘要:转谷氨酰胺酶（蛋白质-谷氨酸-谷氨酰胺转移酶，简称TG）能够催化蛋白质分子间以及蛋白质分子内的酰基转移反应，从而改变蛋白质的功能性质，提高蛋白质的营养价值。在很多方面有巨大的潜能，比如食品生产工业，制药，医学，分析检测，化妆品等领域。转谷氨酰胺酶广泛存在于动植物和微生物中，动物来源的转谷氨酰胺酶比较少，分离纯化工艺较为复杂有难度，所以价格较为昂贵。但是植物来源的也不适合工艺化生产。

本文则是采用微生物发酵法进行转谷氨酰胺酶的分离纯化。首先从土壤中筛选高产转谷氨酰胺酶的菌株，不断纯化获得酶活比较高的菌株，然后分别改变培养时间，温度，pH，转速，探究这些因素对酶活的影响。

关键词  转谷氨酰胺酶；酶活；发酵；优化

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 转谷氨酰胺酶的简介-1

1.1.1 转谷氨酰胺酶的来源-1

1.1.2 转谷氨酰胺酶的作用机理-1

1.1.3 动植物组织中提取TG-1

1.1.4 微生物发酵法生产TG-2

1.2微生物转谷氨酰胺酶-2

1.2.1微生物转谷氨酰胺酶的简介-2

1.2.2微生物转谷氨酰胺酶的结构分析-2

1.2.3微生物转谷氨酰胺酶的编码基因-2

1.2.4微生物转谷氨酰胺酶的活化机制-3

1.3转谷氨酰胺酶在食品中的应用-3

1.3.1 TG在肉制品的应用-3

1.3.2 TG在乳制品中的应用-3

1.3.3  TG在水产品中的应用-4

1.3.4 TG在面粉制品中的应用-4

1.3.5 TG在食品包装中的应用-5

1.4 本课题的研究意义和研究内容-5

1.4.1 研究目的及意义-5

1.4.2 研究内容-5

2 材料与方法-6

2.1 实验材料-6

  2.1.1 材料与试剂-6

  2.1.2 仪器与设备-7

  2.1.3 培养基-7

2.2 实验方法-7

2.2.1 土壤采集-7

2.2.2 菌种分离-8

2.2.3 摇瓶发酵培养-8

2.2.4 凝胶法初筛产酶菌株-8

2.2.5 比色法复筛产酶菌株-8

2.3发酵条件优化-9

2.3.1发酵时间对发酵的影响-9

2.3.2培养温度对发酵的影响-9

2.3.3摇床转速对发酵的影响-9

2.3.4 pH对发酵的影响-9

2.3.5接种量对发酵的影响-9

2.4 试验设计-9

2.4.1 单因素试验-9

2.4.2 发酵正交试验-10

2.4.3 验证试验-10

3 结果与分析-11

3.1 产酶菌株的初筛结果-11

3.1.1 放线菌的筛选结果-11

3.1.2 凝胶法初筛结果-12

3.2 产酶菌株的复筛结果-12

3.3发酵时间对酶活的影响-13

3.4培养温度对酶活的影响-14

3.5转速对酶活的影响-15

3.6初始 pH对酶活的影响-15

3.7接种量对酶活的影响-16

3.8发酵正交试验-16

3.9验证试验-17

结论-19

致谢-20

参考文献-21