党参、合欢皮固体发酵生产灵芝菌质工艺的研究.doc

摘要:本实验采用含有大量三萜类化合物、多糖的合欢皮和党参混合为基质，拣选经诱变后的优质灵芝为菌种，展开固体发酵，研究合欢皮、党参固体发酵灵芝的详细工艺，单因素实验结果表明，党参和合欢皮的最佳质量比是1：1时，多糖和三萜含量都达到最高点，分别为151.24 mg/g、162.94 mg/g；最佳固液比是1.25 g/ml时多糖和三萜含量都达到最高点，分别为149.94 mg/g、164.14 mg/g；最佳装瓶量处于0.24 g/ml时多糖和三萜含量都达到最高点，分别为156.14 mg/g、168.14 mg/g；最佳培养时间是35 d时多糖和三萜含量都达到最高，分别为148.97 mg/g、163.24 mg。响应面结果表明，所得回归模型优化固体发酵工艺，在最佳条件下，即药材比例为0.96，液固比为1.16 mL/g，装瓶量为0.2066 g/mL，多糖含量预测最大值是156.641 mg/g。通过显著性分析，党参与合欢皮培养基长出灵芝菌质测出的多糖含量与党参本身存在显著性差异，多糖含量分别为150.47 mg/g、246.14 mg/g；与合欢皮不存在显著性差异。

关键词：灵芝；合欢皮；党参；固体发酵；多糖；三萜类

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1灵芝概述-1

1.2 灵芝多糖结构和作用-1

1.2.1 灵芝多糖的结构-1

1.2.2 灵芝多糖作用-2

1.3 灵芝三萜的结构和作用-2

1.3.1 灵芝三萜的结构-2

1.3.2 灵芝三萜作用-2

1.4 灵芝的药理药性-3

1.5 合欢皮概述-3

1.6 合欢皮多糖和三萜-3

1.7 党参概述-4

1.8 党参的多糖和三萜-4

1.9 固体发酵技术-4

1.9.1 固体发酵概况-4

1.9.2 固体发酵存在的主要问题-5

1.9.3 固体发酵展望-5

1.10 本课题研究的背景和意义-6

2 材料与方法-7

2.1  实验材料与仪器-7

2.1.1 材料及试剂-7

2.1.2 实验仪器-7

2.1.3  培养基的配制-8

2.2  实验方法-8

2.2.1 灵芝菌种的活化-8

2.2.2 灵芝固体培养基配制-8

2.2.3 单因素试验-8

2.2.4 葡萄糖标准曲线制作-9

2.2.5 齐墩果酸标准曲线制作-9

2.2.6 多糖的提取-10

2.2.7 多糖的测定-10

2.2.8 三萜的提取-10

2.2.9 三萜的测定-11

2.2.10  Box-Behnken试验设计-11

2.2.11数据分析-11

3 结果和讨论-11

3.1 固液比的确定-12

3.2 装瓶量的确定-12

3.3 药材比例的确定-13

3.4 培养时间的确定-13

3.5 Box-Behnken试验设计-14

3.6 回归模型的建立和检验-14

3.7 两因素间的交互效应分析-15

3.8 最佳条件优化及验证结果-16

3.9 不同培养基发酵灵芝后菌质多糖含量比较-17

结论-19

致谢-20

参考文献-21