小球藻内生细菌ZJC2、ZJC3的鉴定与功能研究.doc

摘要:本文研究从已纯化的小球藻中在无菌条件下分离内生细菌ZJC2、ZJC3并进行培养纯化。提取目的菌株的基因组DNA，之后进行PCR操作，得到16S rDNA片段，然后进行凝胶电泳实验以观察DNA的提取情况。最后通过测序，初步确定所要分析菌株的种类。以小球藻中叶绿素a的含量为标准，分析小球藻与ZJC2、ZJC3菌的关系。通过将ZJC2、ZJC3菌株与小球藻共培养，然后利用超声波破碎法破碎细胞壁，提取小球藻的叶绿素a。利用分光光度计测其吸光度，记录数据。根据叶绿素a吸光值，绘制小球藻的生长曲线得到小球藻与ZJC2、ZJC3菌的关系。最终测出，ZJC2、ZJC3菌对小球藻的生长有抑制作用。

关键词 小球藻；内生菌；DNA提取；超声波破碎法；生长曲线

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 藻类-1

1.1.1 藻类综述-1

1.1.2 藻资源的开发前景-1

1.2 小球藻-1

1.2.1 小球藻简介-1

1.2.2 小球藻的功用-1

1.2.3 小球藻的繁殖-2

1.2.4 小球藻的培养技术-3

1.2.5 优化小球藻的培养条件-3

1.2.6 小球藻的应用-4

1.3 小球藻的保藏-4

1.4 藻菌关系-5

2 实验材料和方法-7

2.1 实验材料-7

2.1.1 实验药品-7

2.1.2 主要仪器和设备-7

2.2 实验方法-8

2.2.1 培养基制备-8

2.2.2 高压灭菌-9

2.2.3 小球藻的培养-9

2.2.4 筛选和纯化目的菌种-9

2.2.5 菌种的扩大与保藏-10

2.2.6 菌种活化-10

2.3 16S rDNA序列分子鉴定-11

2.3.1 基因组DNA的提取-11

2.3.2 16S rDNA序列鉴定分析-11

2.4 ZJC2、ZJC3与小球藻生长关系的测定步骤-12

2.5 小球藻的生长情况的测定-12

3 结果与讨论-14

3.1 菌种的筛选与纯化-14

3.1.1 菌种的筛选-14

3.1.2 菌种的纯化-14

3.2 PCR及电泳结果-15

3.2.1 电泳图-15

3.2.2 PCR测序及分析-15

3.3 ZJC2、ZJC3与小球藻生长关系-17

3.3.1 小球藻生长情况-17

3.3.2 小球藻生长曲线-17

3.4 讨论与分析-18

3.4.1 基因组DNA的提取-18

3.4.2 16S rDNA序列的分析-18

3.4.3 ZJC2、ZJC3菌与小球藻的生长关系-18

结论-20

致谢-21

参考文献-22