拟南芥缺铁胁迫响应基因At1G48300的表达分析.docx

摘要:铁是生物体所必需的微量元素之一，研究植物缺铁胁迫响应机理，对改善植物铁营养，培育富铁作用有重要的理论意义。近年来，植物缺铁胁迫响应的基因调控机制取得了较大进展，但仍有不少候选基因的功能有待研究。At1G48300在拟南芥缺铁处理的根部强烈诱导表达，且与已报道的缺铁响应基因共表达在同一网络中。本课题将重点研究At1G48300的表达模式。在前期研究基础上，首先对proAt1G48300：GUS和At1G48300：GFP转基因T3代植株进行筛选，各鉴定到6个不同株系的纯合植株，GFP荧光观察显示At1G48300主要表达在根尖最前端以及根的维管柱中，并且缺铁处理后荧光信号强度大大增强，暗示该基因在缺铁响应中可能具有重要作用。

关键词：拟南芥；缺铁胁迫；At1G48300；GFP

目录

摘要

Abstract

1 文献综述-1

1.1铁在植物中的作用-1

1.2铁的吸收机制-1

1.2.1机制Ⅰ-1

1.2.2机制Ⅱ-1

1.3植物体内铁的转运-2

1.3.1细胞间铁的转运-2

1.3.2细胞内铁的转运-3

1.4植物的缺铁反应调控-3

1.4.1转录因子调控-3

1.4.2其他蛋白调控-4

2 研究论文-5

引言-5

2.1实验材料和仪器-5

2.1.1实验材料-5

2.1.2实验试剂及实验仪器-5

2.2实验方法-6

2.2.1拟南芥材料的种植-6

2.2.2拟南芥DNA提取(TPS法)-7

2.2.3 PCR检测-7

2.2.4琼脂糖凝胶电泳-8

2.2.5拟南芥缺铁处理-8

2.2.6 GFP荧光观察-9

2.2.7 GUS染色观察-9

2.3结果-9

2.3.1 At1G48300 共表达网络分析-9

2.3.2纯合转基因拟南芥的筛选-10

2.3.3纯合转基因拟南芥的检测-12

2.3.4转基因拟南芥正常和缺铁条件下表型观察-13

2.3.5 GFP荧光观察At1G48300表达模式-14

2.3.6 GUS染色观察At1G48300表达模式-15

2.4讨论-15

致    谢-17

参考文献-18