植物活性物质的DNA损伤作用的研究.doc

摘要:［目的］探讨植物活性成分中四种代表性单体活性物质阿魏酸、绿原酸、荭草素和异荭草素对CHO细胞的毒性作用大小和这四种单体物质对CHO细胞是否具有致DNA链断裂的毒性作用以及导致这一结果的作用剂量。

［方法］通过MTT的方法测定四种活性单体物质对CHO细胞增殖毒性作用并求出其IC50，采用单细胞凝胶电泳法（SCGE）检测1-1600 μM四种活性单体物质对CHO细胞的DNA损伤作用。

［结果］通过MTT检测，阿魏酸对CHO 细胞的增殖毒性明显，其半抑制浓度IC50值为1541μM；而绿原酸、荭草素和异荭草素对CHO 细胞均无明显的增殖毒性，无法求得IC50值，但是异荭草素在400μM和800μM时，对细胞有明显的促增殖效应。通过单细胞凝胶电泳试验，阿魏酸对DNA的损伤作用随浓度的增高而增强，100μM和200μM的处理组对CHO细胞无明显的致DNA损伤作用，而400μM 、800μM和1600μM处理组对CHO细胞表现出明显的致DNA损伤作用，其中400μM和800μM处理组的DNA损伤程度要低于阳性对照组，而1600μM浓度组的DNA损伤程度与阳性对照组相当；绿原酸和荭草素的1600μM处理组对CHO细胞有明显的致DNA损伤作用，但要远低于阳性对照组，而其他浓度处理组对CHO细胞则无明显的致DNA损伤作用；异荭草素各浓度处理组对CHO细胞均无明显的致DNA损伤作用。

［结论］在四种单体物质中，阿魏酸对CHO细胞的毒性作用最明显，在最高处理浓度时，细胞存活率低于50%，致DNA损伤程度与50μM甲基磺酸甲酯（阳性对照）相当；而绿原酸、荭草素和异荭草素则均未对CHO细胞表现出明显的毒性作用，细胞存活率都在100%上下波动，DNA的损伤相对也较不明显。

关键词：植物活性物质；MTT；DNA损伤；单细胞凝胶电泳

目录

摘要

Abstract

引言-1

1 材料与方法-3

1.1 材料-3

1.1.1 细胞株-3

1.1.2 主要试剂-3

1.1.3 主要仪器-3

1.2 方法-4

1.2.1 试剂的配制-4

1.2.2细胞培养-5

1.2.2.1 细胞复苏-5

1.2.2.2细胞传代-5

1.2.2.3细胞冻存-6

1.2.3 细胞增值毒性的MTT检测-6

1.2.4 SCGE试验-6

1.2.4.1 细胞处理-6

1.2.4.2 单细胞凝胶电泳-6

1.2.4.3 彗星分析-7

1.2.5 统计学方法-7

2 结果-8

2.1 细胞增殖毒性的MTT检测-8

2.1.1绿原酸对CHO细胞的增殖毒性-8

2.1.2阿魏酸对CHO细胞的增殖毒性-8

2.1.3荭草素对CHO细胞的增殖毒性-9

2.1.4异荭草素对CHO细胞的增殖毒性-9

2.1.5 四种单体物质对CHO细胞增殖毒性的比较-10

2.2 彗星试验结果-11

2.2.1 绿原酸试验结果-11

2.2.2 阿魏酸试验结果-11

2.2.3 荭草素试验结果-12

2.2.4 异荭草素试验结果-13

2.2.5 四种植物单体物质对CHO细胞DNA损伤作用的比较-13

2.3 四种植物化学物质的细胞毒性与DNA损伤作用关系的分析-14

3 讨论-15

参考文献-17

致谢-19